توسعه روش nasba-elisa برای تشخیص hiv-۱ rna

نویسندگان

مریم شهرابی

m. shahrabi دانشکده علوم پزشکی دانشگاه تربیت مدرس مهدی فروزنده

m. forouzandeh دانشیار دانشکده علوم پزشکی دانشگاه تربیت مدرسسازمان اصلی تایید شده: دانشگاه تربیت مدرس (tarbiat modares university) فرزانه صباحی

f. sabahi دانشیار دانشکده علوم پزشکی دانشگاه تربیت مدرسسازمان اصلی تایید شده: دانشگاه تربیت مدرس (tarbiat modares university) مهدی پریان

m. paryan دانشکده علوم پزشکی دانشگاه تربیت مدرسسازمان اصلی تایید شده: دانشگاه تربیت مدرس (tarbiat modares university)

چکیده

چکید ه   سابقه و هدف   با شروع عفونت hiv-1 ، اولین مارکری که در خون آشکار می شود، rna ویروسی می باشد. از میان روش های موجود که شناسایی rna را هدف قرار می دهند؛ متداول ترین روش ها nasba و rt-pcr هستند. nasba مزیت های متعددی نسبت به rt-pcr ارایه می کند. در این پژوهش، واکنش nasba در ترکیب با روش آشکارسازی آسان و حساس الایزا، برای تشخیص و آشکارسازی hiv-1 rna مورد استفاده قرار گرفت.   مواد و روش ها   نوع مطالعه انجام شده از نوع بنیادی ـ کاربردی بود. با وارد کردن نوکلئوتید 11-dig-utp در مخلوط واکنش nasba ، rna نشاندار تولید شد. آن گاه محصولات نشاندار nasba در فاز مایع به یک پروب اختصاصی متصل به بیوتین هیبرید شدند. سپس هیبریدهای حاصل به یک پلیت پوشیده شده با استرپتواویدین منتقل شده، پس از اعمال شستشوها و خارج کردن محصولات غیر اختصاصی از محیط واکنش، آشکارسازی نهایی با اضافه کردن کونژوگه آنتی دیگوکسی ژنین ـ آنزیم و سوبسترای آن صورت گرفت.   یافته ها   نتایج به دست آمده نشانگر کارآیی واکنش nasba در تکثیر ناحیه مورد نظر از ژنوم ویروس بود و آشکارسازی محصولات nasba بر روی ژل آگاروز منحصراً یک باند 176 نوکلئوتیدی مربوط به هدف را نشان می داد. با به کارگیری روش الایزا در آشکارسازی محصولات nasba ، برای غلظت 01/0 مایکرو مولار پروب، od برابر با 11/0 ± 049/1 به دست آمد.   نتیجه گیری   در این مطالعه با به کارگیری آغازگر و پروب مناسب، روش تشخیصی nasba-elisa با حساسیت و اختصاصیت بالا برای hiv-1 راه اندازی شد.

برای دانلود باید عضویت طلایی داشته باشید

برای دانلود متن کامل این مقاله و بیش از 32 میلیون مقاله دیگر ابتدا ثبت نام کنید

اگر عضو سایت هستید لطفا وارد حساب کاربری خود شوید

منابع مشابه

توسعه روش NASBA-ELISA برای تشخیص HIV-1 RNA

  چکید ه   سابقه و هدف   با شروع عفونت HIV-1 ، اولین مارکری که در خون آشکار می‌شود، RNA ویروسی می‌باشد. از میان روش‌های موجود که شناسایی RNA را هدف قرار می‌دهند؛ متداول‌ترین روش‌ها NASBA و RT-PCR هستند. NASBA مزیت‌های متعددی نسبت به RT-PCR ارایه می‌کند. در این پژوهش، واکنش NASBA در ترکیب با روش آشکارسازی آسان و حساس الایزا، برای تشخیص و آشکارسازی HIV-1 RNA مورد استفاده قرار گرفت.   مواد و روش‌ه...

متن کامل

طراحی و توسعه تکنیک nasba-elisa برای تشخیص عفونت ویروس نقص ایمنی انسان در خون

چکیده طی دو دهه اخیر روشهای تشخیص hiv نقش مهمی را در حفظ سلامت در جهان ایفا کرده اند. روشهای مولکولی با حساسیت بالا نیز که اخیرا توسعه یافته اند قادرند عفونت را در مراحل بسیار ابتدایی نیز تشخیص دهند ؛ اما بسیاری از این تکنولوژی ها در کشور های در حال توسعه به دلایل اقتصادی قابل اجرا نیستند ؛ ولی چنانچه از هزینه های مربوط به این روشها کاسته شود استفاده از انها میسر می شود . با شروع عفونت hiv-...

15 صفحه اول

تشخیص سریع rna ویروس hiv-۱ به وسیله روش real-time transcription mediated amplification

زمینه و هدف: روش های ملکولی متعددی توسعه یافته اند که قادرند با حساسیت و ویژگی متفاوتی hiv-1 را در نمونه های بالینی تشخیص دهند. در این مقاله نتایج حاصل از یک مطالعۀ ارتباط سنجی در راه اندازی و به کارگیری یک روش real-time pcr tma نوین جهت تشخیص هم دمای ویروس hiv-1 ارائه شده است. مواد و روش ها: در این مطالعۀ مقطعی، ست پرایمر و پروب molecular beacon توسط نرم افزارهای اختصاصی و برای یک ناحیۀ 176 جف...

متن کامل

طراحی و به کارگیری روش rt-pcr elisa multiplex برای تشخیص عفونت همزمان hcv و hiv-۱

هدف: علیرغم غربالگری خون های اهدایی با روش های حساس مبتنی بر شناسایی آنتی بادی، همچنان خطر انتقال عفونت های ویروسی وجود دارد. بنابراین طراحی روش های حساس مبتنی بر شناسایی اسید نوکلئیک مورد توجه قرار گرفته است. هدف از این تحقیق طراحی روشی حساس تر در مرحله شناسایی نسبت به روش های معمول و همچنین تشخیص همزمان عفونت های ویروس نقص ایمنی اکتسابی تیپ یک و ویروس هپاتیت c در یک نمونه است. مواد و روش ها: ...

متن کامل

تشخیص اسینتوباکتر بائومانی با استفاده از روش PCR-ELISA

زمینه و هدف: اسینتوباکتر بومانی عامل عفونت های دستگاه تنفسی، دستگاه ادراری، خون و زخم ها به خصوص در بخش مراقبت های ویژه می باشد و توانایی کسب مقاومت دارا می باشد. به منظور تشخیص به موقع و پیگیری فرایند درمان این عفونت ها، لازم است که تکنیک ها به طور مستمر اصلاح شوند. با توجه به اینکه تاکنون مطالعه ای در زمینه شناسایی و جداسازی این باکتری در نمونه های بالینی در ایران با روش PCR-ELISA انجام نشده...

متن کامل

منابع من

با ذخیره ی این منبع در منابع من، دسترسی به آن را برای استفاده های بعدی آسان تر کنید


عنوان ژورنال:
فصلنامه پژوهشی خون

جلد ۸، شماره ۱، صفحات ۴۲-۵۱

کلمات کلیدی

میزبانی شده توسط پلتفرم ابری doprax.com

copyright © 2015-2023